使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
訂購信息：
產(chǎn)品名稱：小反芻獸疫通用型和野毒株（PPR-U/ PPR-W）雙重熒光定量PCR試劑
英文名稱：詳見說明
貨號：BJ-01R5103
產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒
運輸：低溫
保存：負20度
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】：
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；
u 運輸：采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。
本公司產(chǎn)品僅用于科研。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
Streptavidin Protein 1g 10(S),17(S)-DiHDHA 5mg
PCMTD1 Human 1mg 4??hydroxy Tamoxifen 100mg
3MB-PP1 1g Baccatin III 50mg
Cabozantinib malate (XL184) 100μg (d(CH?????D-Ile2,Ile??Arg??Ala-NH??)-Vasopressin 1mg
Tauro-ω-muricholic Acid (sodium salt) 25μg Cenobamate (YKP3089) 100mg
Ceftriaxone sodium salt (Disodium ceftriaxone) 5g Ioversol (MP-328) 2μg
Cycloheximide 10mg Pasireotide 2μg
Imexon (BM 06002) 1mg Paclitaxel (Taxol) 100mg
D-Glucose-6-phosphate (sodium salt) 5mg Flubromazepam 250mg
TRAF-STOP inhibitor 6877002 10mM*1mLinDMSO BB-Cl-Yne 25mg
Vacuolin-1 10mg Etoricoxib 5mg
Dianicline 50mg ROC-325 25g
1,3-Dioleoyl-2-Stearoyl-rac-glycerol 100mg Zanubrutinib (BGB-3111) 5mg
1,2-Diheptadecanoyl-sn-glycero-3-PC 10mM*1mLinDMSO Hoechst 33342 analog 2 trihydrochloride 5mg
([ring-D?]Phe??-Angiotensin II 5μg 3-Methoxybenzoic acid (3-Anisic acid) 100mg
小反芻獸疫通用型和野毒株（PPR-U/ PPR-W）雙重熒光定量PCR試劑ACT-1002-1237(R,S）
N-((1R,3s,5S)-8-Benzyl-8-azabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)isobutyramide
tert-butyl 4-((1-(4-chlorobenzyl)-3-hydroxy-2-oxo-1,2-dihydropyridin-4-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
2-methyl-2-(4-nitrophenyl)propanenitrile
BMS-1001 hydrochloride BMS-1001 hydrochloride 是具有口服活性的、人 PD-L1/PD-1 **檢查點的抑制劑。BMS-1001 hydroc
CMD178 CMD178 是一種重要的多肽，能夠持續(xù)地通過抑制 IL-2/s IL-2Rα 信號通路來減少 Foxp3 和 STAT5 的表達。CMD 178 是 STAT
Cyclo（RGDfK） Cyclo(-RGDfK) 是有效，選擇性的整合素 αvβ3 抑制劑，其 IC50 值為 0.94 nM。Cyclo(-RGDfK) TFA 通過與細胞表面的
BK-1361（BK1361，cyclo-RLsKDK） BK-1361（BK1361，cyclo-RLsKDK）是一種具有RLsKDK（s=D-絲氨酸）的環(huán)肽，其作為ADAM8的有效選擇性抑制劑起作用，IC50為12
BQ-123 BQ-123 是一種選擇性內(nèi)皮素 A 受體 (ETAR) 拮抗劑，IC50 值為 7.3 nM，Ki值為 25 nM。
Ezatiostat (TER199 free base; TLK199) Ezatiostat (TER199 free base; TLK199) 是一種谷胱甘肽的三肽類似物，也是一種選擇性的口服活性的谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶 P1-1