操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
羥甲基戊二酰輔酶A合成酶(HMGCS)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-01611152-100管/96樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義
羥甲基戊二酰輔酶A合酶是甲羥戊酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶,催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA**羥甲基戊二酰CoA。
測(cè)定原理
HMGCS催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA**羥甲基戊二酰CoA,同時(shí)產(chǎn)生CoASH,使DTNB轉(zhuǎn)化為黃色的TNB,在412nm下有特征吸光值。
所需的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Cytarabine 抗代謝劑Cytarabine 1mL(10mM)|100mg|500mg|1g
Pifithrin-β hydrobromide p53抑制劑(Pifithrin-β) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
LH846 CK1δ抑制劑(LH846) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Lomitapide MTP抑制劑(Lomitapide) 1mL(10mM)|10mg|50mg
RAD51 Inhibitor B02 RAD51抑制劑(RAD51 Inhibitor B02) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
STAT5-IN-1 STAT5抑制劑(STAT5-IN-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
SCH900776 Chk1抑制劑(SCH900776) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Piperine P-glycoproteinand CYP3A4抑制劑(Piperine) 1mL(10mM)|200mg|1g|5g
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(2×) 1ml×6
Sapitinib EGFR抑制劑(Sapitinib) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
NKP-1339 NKP-1339 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit Or Mouse 即用型**組化試劑盒(小鼠/兔源一抗) 80T|160T
Trazodone hydrochloride 5羥色胺受體拮抗劑和重吸收抑制劑 1mL(10mM)|100mg|500mg
Phlorizin hSGLT1和hSGLT2抑制劑(Phlorizin) 1mL(10mM)|1g|5g
羥甲基戊二酰輔酶A合成酶(HMGCS)生化試劑盒(微量法)大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞英文名稱:CT-26 WT
人內(nèi)**(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞英文名稱:CT-26 WT
人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠結(jié)締組織纖維細(xì)胞英文名稱:LTK
倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠巨噬細(xì)胞英文名稱:Ana-1
人β防御素1(HβD-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠巨噬細(xì)胞英文名稱:J774A.1
小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠**管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D(MICD)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠**成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL