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分光光度法的介紹
日期：2024-11-23 08:01
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摘要：
分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)，是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中*常用的實(shí)驗(yàn)方法。許多物質(zhì)的測(cè)定都采用分光光度法。在分光光度計(jì)中，將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí)，便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。
在分光光度計(jì)中，將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí)，便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。如以波長(zhǎng)（λ）為橫坐標(biāo)，吸收強(qiáng)度（A）為縱坐標(biāo)，就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法，稱為分光光度法，也稱為吸收光譜法。用紫外光源測(cè)定無(wú)色物質(zhì)的方法，稱為紫外分光光度法；用可見(jiàn)光光源測(cè)定有色物質(zhì)的方法，稱為可見(jiàn)光光度法。它們與比色法一樣，都以Lambert-Bee定律為基礎(chǔ)。
上述的紫外光區(qū)與可見(jiàn)光區(qū)是常用的。但分光光度法的應(yīng)用光區(qū)包括紫外光區(qū)，可見(jiàn)光區(qū)，紅外光區(qū)。波長(zhǎng)范圍：
1、200～400nm的紫外光區(qū)
2、400～760nm的可見(jiàn)光區(qū)
3、2.5～25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm-1～400cm-1)的紅外光區(qū)。
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