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收到常溫A875細胞后如何處理的介紹
日期:2024-11-23 09:36
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摘要:
收到常溫A875細胞后如何處理:
1. 先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與我司聯(lián)系。
2. 用 75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 2-4 小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 貼壁細胞:若細胞生長密度超過 80%,可正常傳代;若未超過 80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留 5ml 左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達 80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6. 懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無菌離心管內(nèi),1200rpm 離心 5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過 80%,可將細胞懸液分至 2 個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至 5ml;若細胞密度未超過 80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達 80%左右時再進行傳代操作。
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