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細(xì)胞凍存操作步驟

日期:2024-11-22 18:29
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摘要: 細(xì)胞凍存操作步驟: 1、消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液收集至離心管中。 2、1000rpm離心10分鐘,棄上清液。 3、沉淀加含保護(hù)液的培養(yǎng),計數(shù),調(diào)整至5×106/ml左右。 4、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。 5、將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口要嚴(yán),否則復(fù)蘇時易出現(xiàn)爆裂。 6、貼上標(biāo)簽,寫明細(xì)胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細(xì)繩。 7、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時)→氣態(tài)氮(30分鐘)→液...

細(xì)胞凍存操作步驟:

1、消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液收集至離心管中。

2、1000rpm離心10分鐘,棄上清液。

3、沉淀加含保護(hù)液的培養(yǎng),計數(shù),調(diào)整至5×106/ml左右。

4、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。

5、將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口要嚴(yán),否則復(fù)蘇時易出現(xiàn)爆裂。

6、貼上標(biāo)簽,寫明細(xì)胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細(xì)繩。

7、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時)→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。

注意:操作時應(yīng)小心,以免液氮**。液氮定期檢查,隨時補(bǔ)充,不能揮發(fā)干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。

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