操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:考馬斯亮藍(lán)G250蛋白快速染色液
規(guī)格:250ml
測(cè)試方法:
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
干擾素-β抗原IFN- Beta (Interferon Beta) human 0.5mg
小鼠骨成型蛋白2BMP-2(Mouse Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 96T
大鼠神經(jīng)肽ANKA ELISA Kit(Ret) 96T
人高敏三碘甲狀腺原氨酸u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 96T
激活素受體2B抗體英文名稱:Activin Receptor Type IIB 0.2ml 組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA試劑盒 TPS ELISA Kit
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體英文名稱:ASB8 0.2ml 糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA試劑盒 GSK-3 ELISA Kit
細(xì)胞分裂周期蛋白2抗體英文名稱:CDCA2 0.2ml 軍團(tuán) 抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒 LP Ab-IgG ELISA Kit
環(huán)指蛋白215抗體英文名稱:RNF215 0.2ml
20號(hào)染色體開放閱讀框70抗體英文名稱:C20orf70 0.2ml 孕烷X受體(PXR)ELISA試劑盒 PXR ELISA Kit
Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體英文名稱:FASTKD1 0.2ml 妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試劑盒 PAPPA ELISA Kit
凝血因子10抗體英文名稱:Factor X heavy chain 0.2ml 磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA試劑盒 GPC2 ELISA Kit
G1氨基丁酸A型受體α1抗體英文名稱:GABA A Receptor alpha 1 0.1ml 高遷移率族蛋白1(HMG1)ELISA試劑盒 HMG1 ELISA Kit
中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體英文名稱:IFFO 0.2ml 白介素10受體α(IL10Rα)ELISA試劑盒 IL10Rα ELISA Kit
髓細(xì)胞性白血病蛋白1抗體英文名稱:MLF1 0.2ml 90kDa熱休克蛋白αB1(HSP90αB1)ELISA試劑盒 HSP90αB1 ELISA Kit
去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體英文名稱:NET1 0.2ml
磷酸脂磷酸水解酶2抗體英文名稱:PPAP2C 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)G250蛋白快速染色液全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次多潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Domperidone 57808-66-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
冰凍切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次氯硝柳胺 Niclosamide 50-65-7 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位間接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次氯硝柳胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Niclosamide 50-65-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位直接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次環(huán)丙沙星 Ciprofloxacin 85721-33-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次環(huán)丙沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Ciprofloxacin 85721-33-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
全組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次泛昔洛韋 Famciclovir 104227-87-4 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次泛昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Famciclovir 104227-87-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位間接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次氟達(dá)拉濱磷酸酯 Fludarabine Phosphate 75607-67-9 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR
石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位直接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次噴昔洛韋 Penciclovir 39809-25-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒(與紅細(xì)胞無法分別) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次伊曲康唑 Itraconazole 84625-61-6 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
全組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Itraconazole 84625-61-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次氟康唑 Fluconazole 86386-73-4 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,CP2005,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次氟康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Fluconazole 86386-73-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次鹽酸齊拉西酮 Ziprasidone HCl 138982-67-9 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR