操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:檸檬酸合成酶(CS)活性測定試劑盒
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
氧化鐵(III)(>98%,BC) Iron (III) oxide 1309-37-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 組蛋白H3-K9(mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
還原鐵粉(>98%,BC) ron powder reduced 7439-89-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 組蛋白H3-K18(mono)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
異佛爾酮(>98%,BR) Isophorone 78-59-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H3-K23甲基化(mono/di)檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
異香草醛(>98%,BR) Isovanillin 621-59-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H3-K27(mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
異香草醛(標(biāo)準(zhǔn)品) Isovanillin 621-59-0 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 組蛋白H3-K36(mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
衣康酸(>98%,BR) Itaconic acid 97-65-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H3-K56(mono/di)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
哲納爾氏染色素 Jenner's stain 62851-42-7 質(zhì)量規(guī)格:BS 組蛋白H3-K79(mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
蛋白激酶仰制劑KT5823(>97%(HPLC),BC) KT-5823 126643-37-6 質(zhì)量規(guī)格:>97%(HPLC),BC 組蛋白H3-K122(mono)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
L-阿拉伯糖醇(>98%,BR) L(-)-Arabitol 7643-75-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H4-K20(mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
L(-)-二苯甲酰酒石酸一水(>98%,BR) L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate 62708-56-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組蛋白H4-K31(mono)甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
乳糖酸(>98%,BC) Lactobionic acid 96-82-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 組蛋白H2A-T120磷酸化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 9000-89-9 質(zhì)量規(guī)格:BC 組蛋白H2A-T129磷酸化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 9000-89-9 質(zhì)量規(guī)格:BC 組蛋白H3-T3磷酸化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
乙酸鑭五水(>99%,BR) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate 100587-90-4 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 組蛋白H3-T11磷酸化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次等
檸檬酸合成酶(CS)活性測定試劑盒大鼠白介素16(IL16)ELISA試劑盒 英文名: IL16 ELISA Kit
小鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA試劑盒 英文名: HSPβ2 ELISA Kit
大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 英文名: IL-2sRβ ELISA Kit
大鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 英文名: IL-33 ELISA Kit
小鼠C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒 英文名: C4BPα ELISA Kit
大鼠類胰蛋白酶(TPS)ELISA試劑盒 英文名: TPS ELISA Kit
小鼠組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒 英文名: CTSL ELISA Kit
大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 英文名: AECA ELISA Kit
小鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒 英文名: LXA4 ELISA Kit
小鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 英文名: HDL ELISA Kit
大鼠正五聚蛋白3(PTX3)ELISA試劑盒 英文名: PTX3 ELISA Kit
小鼠促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA試劑盒 英文名: TRH ELISA Kit
大鼠胸腺表達(dá)趨化因子25(TECK/CCL25)ELISA試劑盒 英文名: TECK/CCL25 ELISA Kit
大鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)ELISA試劑盒 英文名: SIRT3 ELISA Kit