操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱:肌酸激酶(CK)活性測(cè)定試劑盒
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明
測(cè)試方法:詳見(jiàn)說(shuō)明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
L-天門(mén)冬氨酸 L-Aspartic acid 56-84-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 組織樣品固著液 (Helly或B5或HARTMAN固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天門(mén)冬氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Aspartic acid 56-84-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 肝脾組織樣品固著液(Helly固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-半胱胺酸鹽酸鹽無(wú)水物 L-Cysteine hydrochloride,anhydrous 52-89-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 核固著液(ZENKER) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱氨酸 Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine 638-23-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 冰凍組織固著液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
S-芐基-L-半胱氨酸 S-Benzyl-L-cysteine 421492 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 組織灌注固著液(4%中性多聚甲醛固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-谷氨酸鹽酸鹽 L-Glutamic acid hydrochloride 138-15-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 光鏡樣品固著液(10%Formalin 固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
N'-硝基-L-精氨酸(L-NNA) Nω-Nitro-L-arginine 2149-70-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 電鏡樣品固著液(Karnovsky固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
Nα-苯甲酰-L-精氨酸 Nalpha-Benzoyl-L-arginine 154-92-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 電鏡樣品固著液(2%Formalin 固著液) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天冬酰胺,無(wú)水物(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Asparagine Anhydrous 70-47-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 電鏡組織基吡啶固著液(2,4,6-Trimethylpyridine puriss) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天冬素/L-天冬酰胺 L-Asparagine anhydrous 70-47-3 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,無(wú)水物 10%Formalin固著液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
N'-(三苯甲基)-L-天冬酰胺 N'-Trityl-L-asparagine 132388-58-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 20%Formalin固著液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天冬氨酸-1-芐酯 L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester 7362-93-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 10%中性Formalin固著液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天門(mén)冬氨酸1-甲酯 L-Aspartic acid 1-methyl ester 17812-32-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 20%中性Formalin固著液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽 L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride 16856-13-6 質(zhì)量規(guī)格:0.98 酸性福爾馬林固著液(Formalin-Acetic Acid) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50毫升
肌酸激酶(CK)活性測(cè)定試劑盒小鼠前腦啡肽(PENK)ELISA試劑盒 英文名: PENK ELISA Kit
大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 英文名: IL-17 ELISA Kit
小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒 英文名: CC16 ELISA Kit
小鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒 英文名: COL4 ELISA Kit
大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源趨化因子(MDC)ELISA試劑盒 英文名: MDC ELISA Kit
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)ELISA試劑盒 英文名: TGFβI ELISA Kit
大鼠精氨酸加壓素(AVP)ELISA試劑盒 英文名: AVP ELISA Kit
小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名: PROGR ELISA Kit
小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)ELISA試劑盒 英文名: SIRT6 ELISA Kit
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)ELISA試劑盒 英文名: SCD ELISA Kit
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 英文名: C3a ELISA Kit
大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 英文名: FN ELISA Kit
小鼠跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA試劑盒 英文名: TMEM27 ELISA Kit
小鼠神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 英文名: NSE ELISA Kit