組成：
48孔配制：
1.說(shuō)明書(shū): 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1個(gè)
4  酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  產(chǎn)品名稱說(shuō)明書(shū):1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1個(gè)
4.  酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
注：本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷(xiāo)售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品名稱：大鼠還原型輔酶ⅠELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Nicotinic acetylcholine receptor

檢測(cè)范圍：37.5ng/mL~1200pg/mL

靈敏度：1

產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-R70128
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫
度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
直接進(jìn)入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。 

注意事項(xiàng):
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
2,3',4,4'-四羥基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T)) 2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone 61445-50-9 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)(T)  氨芐青霉素溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10毫克/毫升

1,4-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,4-Bis(4-aminophenoxy)benzene 581437 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)  G418溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10毫克/毫升

1,3-雙(4-羥基苯氧基)苯(>97.0%(GC)) 1,3-Bis(4-hydroxyphenoxy)benzene 126716-90-3 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)  慶大霉素溶液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10毫克/毫升

1,4-雙(3-羥基苯氧基)苯(>96.0%(GC)) 1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene 5085-95-0 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)  蛋白酶抑制劑混合液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：保留細(xì)胞內(nèi)成分活性A、 動(dòng)物細(xì)胞B、 細(xì)C、 酵母D、 植物

2,2'-雙(羥甲基)二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether 10038-40-1 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  磷酸酶抑制劑混合液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：抑制磷酸酶活性

雙(2-甲酰苯基)醚(>98.0%(GC)) Bis(2-formylphenyl) Ether 49590-51-4 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  蛋白酶/磷酸酶完全抑制混合液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：抑制蛋白破壞性生物酶活性

1,3-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 2479-46-1 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)  裂解液Ⅰ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：制備活性化亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)

4-氨基-4'-氯二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether 101-79-1 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)  裂解液Ⅱ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：制備活性化細(xì)胞蛋白

4-氯-4'-羥基二苯醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 21567-18-0 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)  裂解液Ⅲ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：各種活性化細(xì)胞制備處理

4,4'-二硝基二苯醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 101-63-3 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)  裂解液Ⅳ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：不確保細(xì)胞內(nèi)活性的成分制備

3,4'-二氨基二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 3,4'-Diaminodiphenyl Ether 2657-87-6 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)  裂解液Ⅴ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：紅細(xì)胞裂解液/白細(xì)胞分離

1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 3061-36-7 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  裂解液Ⅵ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：線粒體裂解液

4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 2215-89-6 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)  裂解液Ⅶ-1 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：細(xì)裂解液

4,4'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 23994 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  裂解液VII-2 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：葡萄球裂解液

大鼠還原型輔酶ⅠELISA檢測(cè)試劑盒小鼠 TNFRSF10B / TRAILR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆GZMB/Granzyme B  顆粒酶B抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 THSD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆GPAM  線粒體甘油3磷酸?；D(zhuǎn)移酶抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 TIMP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆Granzyme D/B/E/N/G/F/H  顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 ELANE / ELA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆GPD1  甘油三磷酸脫氫酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 ACVR2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆GPD2  線粒體甘油三磷酸脫氫酶2抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 EFNB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆GRB10  生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 CD36 基因全長(zhǎng)ORF克隆Phospho-GRB10 (Tyr67)  磷酸化生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 CTSA 基因全長(zhǎng)ORF克隆UTS2R/GPCR GPR14  G蛋白偶聯(lián)受體14抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 MIF 基因全長(zhǎng)ORF克隆GPR15  G蛋白偶聯(lián)受體15抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 LYVE-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆GNPAT  磷酸二羥丙酮?；D(zhuǎn)移酶抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 OGN 基因全長(zhǎng)ORF克隆GREB1  乳腺癌雌調(diào)控蛋白GREB1抗體規(guī)格: 0.1ml

小鼠 MBL 基因全長(zhǎng)ORF克隆GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser)  兔抗粘附多肽抗體規(guī)格: 0.2ml

小鼠 LY86 / MD-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆GPR30  G蛋白偶聯(lián)受體30抗體規(guī)格: 0.1ml