注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱：氨基甲酰磷酸合成酶I試劑盒
產(chǎn)品貨號：BJ-100414
規(guī)格：48T/96T
主要成分：酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
組成：
48孔配制：
1.說明書: 1份
2. 封板膜: 2片（48）
3. 密封袋: 1個
4 酶標包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標準品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標準品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1. 產(chǎn)品名稱說明書:1份
2. 封板膜:2片（96）
3. 密封袋: 1個
4. 酶標包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 標準品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標準品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫
度達到 98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復，
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育
30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37
℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準
黃柏堿Phellodendrine(≥98%,HPLC)6873-13-820MG
草酰乙酸Oxaloacetic acid (≥97%, for cell cult...328-42-75G
朝藿定A1Epimedin A1(≥98%,HPLC)Null20MG
乙基甲磺酸脂Ethyl methanesulfonate (≥99%, EMS, li...62-50-05G
莪術(shù)二酮Curdione(≥98%,HPLC)13657-68-620MG
2,6-二氯靛酚鈉2,6-Dichloroindophenol sodium (≥98%, ...620-45-15G
葑酮(+)-Fenchone (terpene standard for GC,...4695-62-91ML
楊梅苷Myricetrin(,≥99%,HPLC)17912-87-720MG
L-鼠李糖L-Rhamnose monohydrate (≥99.0%)10030-85-05G
人參皂苷RoGinsenoside Ro (≥98%,HPLC)34367-04-920MG
三白草酮Sauchinone (≥98%,HPLC)177931-17-820MG
3,5-二甲氧基苯酚3,5-Dimethoxyphenol (≥99%)500-99-210G
氨基甲酰磷酸合成酶I試劑盒TOP1mt 線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 規(guī)格: 0.1ml
RBFA 核糖體結(jié)合因子RBFA抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC47 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 規(guī)格: 0.2ml
GIMAP3 GTP酶IMAP家族成員3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Separase 紡錘體級以外蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Defensin alpha 4 防御素α4抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD3 epsilon CD3抗體 0.1ml
phospho-Bax(Ser184) 磷酸化Bax抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Gold 膠體金標記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.5ml
ATP4B 鉀ATP酶通道蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
AGER 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格: 0.1ml
TNFAIP8 瘤壞死因子α誘導蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。