微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

基本信息：

產(chǎn)品名稱：柄孢殼菌保存

拉丁文: Podospora│cochleariformis

分離基物: 土樣

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 14

生長(zhǎng)條件: 30℃

存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

培養(yǎng)方法:

培養(yǎng)基 0012

生長(zhǎng)條件 28℃

存儲(chǔ)條件 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。

干擾素-γ多肽抗原（人） IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human 特價(jià)促銷 規(guī)格:  0.5mg

去氧膽酸鹽瓊脂      進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于大腸桿固體平板測(cè)定,腸道選擇性分離 Desoxycholate Lactose Agar 250

膽硫乳瓊脂（DHL）  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 腸道選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門氏的選擇性分離（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)） Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar 250

SCHAEDLER 瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于厭氧的分離培養(yǎng)(Acumedia 方法) SCHAEDLER AGAR 250

副溶血性弧增液 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于副溶血性弧的增培養(yǎng)  250

UVM 添加劑1 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 添加到HB4195中，用于李氏的選擇性增培養(yǎng) UVM Supplement1 1ml*10支

豆粉瓊脂（血瓊脂基礎(chǔ)）   進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于配制血瓊脂、巧克力瓊脂及亞碲酸鹽瓊脂 Blood Agar Base 250

三號(hào)膽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于抑制革蘭氏陽性的生長(zhǎng) No. 3 Bile Salt  100

無雞血清 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 100毫升 Sterile Defidrinated Chicken Blood BR

柄孢殼菌保存CNTD  細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

BMP4  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 0.1ml

CTR9  血小板活化因子CTR9抗體 0.2ml

Ack1  醋酸激酶1抗體 0.2ml

Cofilin  肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體 0.1ml

BIN3  細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 0.2ml

ATG9B  自噬相關(guān)蛋白9B抗體 0.2ml

Exendin 4  GLP1類似蛋白Exendin4抗體 0.1ml

RFPL2/RFPL3  RET指蛋白樣2/3抗體 0.2ml

PAR3  非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體 0.1ml

ABCF1  ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml

connexin-30  間隙連接蛋白30抗體 0.1ml

AGTRAP  血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml