培養(yǎng)及打管說(shuō)明：

1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

基本信息：

產(chǎn)品名稱(chēng)：長(zhǎng)柄鏈格孢保存

拉丁文: Alternaria│longipes

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 14

生長(zhǎng)條件: 25-28℃

存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

培養(yǎng)方法:

培養(yǎng)基 0012

生長(zhǎng)條件 28℃

存儲(chǔ)條件 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱(chēng)為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。

發(fā)酵蛋白胨                            進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)   250

牛膽鹽 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 25克 Bile salt from ox BR，60%

卵黃高鹽瓊脂基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 Egg-Yolk Salt Agar Base 生物制品金黃色葡萄球選擇性分離

改良MRS瓊脂培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 MRS Lactotacillus Agar Modified 乳酸的測(cè)定，雙歧桿和嗜酸乳酸的計(jì)數(shù)

OF培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 HLGB 細(xì)的氧化發(fā)酵試驗(yàn)

TCBS瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 TCBS Agar 用于霍亂、副溶弧的分離培養(yǎng)

葡萄糖半固體發(fā)酵管 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 Dextrose Semisolid Medium 用于志賀氏的生化試驗(yàn)

印度墨水 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 100毫升 Indian ink 炭疽桿檢測(cè)用配套試劑

葡萄糖發(fā)酵管 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 20支 葡萄糖發(fā)酵管 BR

長(zhǎng)柄鏈格孢保存CENPO  著絲粒蛋白O抗體 0.2ml

MID2/RNF60/Midline-2  環(huán)指蛋白60抗體 0.2ml

CCDC106  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體 0.2ml

phospho-eIF4G(ser1108)  磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 0.1ml

SASH1  腫瘤抑制基因PEPE1抗體 0.2ml

HAND2  心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 0.1ml

PTPH1/PTPN3  蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗體 0.2ml

Cactin/C19orf29  19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體 0.2ml

SRRM2  絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體 0.2ml

CD137/TNFRSF9  腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體 0.1ml

DP-I  橋粒斑蛋白1抗體 0.2ml

Cphospho-C CBL(Tyr700)  磷酸化原癌基因CBL2抗體 0.1ml

Glutaredoxin 1  谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml