基本信息：

產(chǎn)品名稱：BL21 DE3 大腸桿菌培養(yǎng)

拉丁文:

Escherichia coli BL21(DE3)

提供形式: 西林瓶，菌片

**等級: 1

模式菌株: 未知

應用領域: 用于蛋白表達

培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min**。

生長條件: 37℃，有氧，LB

培養(yǎng)方法:

培養(yǎng)基 0012

生長條件 28℃

存儲條件 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。

 EEM 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于腸道致病的增（日本）現(xiàn)貨促銷

 改良 UVM 增液基礎 250g/瓶 用于李斯特氏的選擇性增，每225ml  培養(yǎng)基中添加  21422、21413各 1 支現(xiàn)貨促銷

 選擇性牛心湯增培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鏈球選擇性增現(xiàn)貨促銷

 碎肉葡萄糖肉湯基礎 250g/瓶 用于厭氧特別是專性厭氧的 培養(yǎng)、增和修復，含維生素 K， 需添加 11002（庖肉牛肉粒）現(xiàn)貨促銷

 酵母基礎，無維生素 250g/瓶 用于通過維生素的利用對酵母 進行分類現(xiàn)貨促銷

 戊烷脒多粘素瓊脂基礎PAP  250g/瓶 用于炭疽桿分離培養(yǎng)，每 100ml培養(yǎng)基中添加  1  支  22101、1  支221032 和 2ml50701現(xiàn)貨促銷

 Tinsdale 瓊脂基礎添加劑 5ml×10 支/盒 每支用于 100ml12501 中現(xiàn)貨促銷

A1 培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于檢測水中的大腸群(US-EPA標準)

新生霉素 現(xiàn)貨促銷 1.5mg/支*5 使用前，每支加入100mlHB4153中

BL21 DE3 大腸桿菌培養(yǎng)Phospho-MSK1(Thr581)  磷酸化有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗人IgG 0.1ml

PPIA/Cyclophilin A  親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIA抗體 0.1ml

phospho-GSK-3 Beta(Ser21+Ser29)  磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 0.1ml

TRA16  孤兒受體相關蛋白抗體 0.1ml

LH  促黃體**素抗體 0.1ml

Phospho-MEK6 (Ser207)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Bio  生物素標記的驢抗羊IgG 0.1ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

SLC7A9  離子轉(zhuǎn)運相關蛋白SLC7A9抗體 0.2ml

Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181)  磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG 1mg

Phospho-mTOR (Thr2446)   磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 0.1ml

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。