☆常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

公司優(yōu)勢：

☆銷售方面，公司已有多年的銷售經(jīng)驗，早已形成一套完整的產(chǎn)銷鏈條，在業(yè)內是有口皆碑的；

☆技術背景，我司是專業(yè)的生物技術公司，擁有一批專業(yè)技術人才和技術設備，專業(yè)實力雄厚；

☆主營產(chǎn)品，我司主打ELISA試劑盒代理各種世界品牌的細胞、菌株、抗體、培養(yǎng)基、血清以及其他生化試劑等各方面的生物試劑，種類齊全，數(shù)量繁多，能滿足生命領域里的不同科研需求；

☆公司理念，公司秉承質量為上、誠信經(jīng)營的理念。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱：黑根霉說明書

拉丁文:

Rhizopus nigricans Ehrenberg

提供形式: 凍干粉

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: CPDA

生長條件: 25-28℃

培養(yǎng)方法：

培養(yǎng)基 MRS培養(yǎng)基：酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。

生長條件 37℃，厭氧

儀器設備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

保存方法：

☆傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。

☆懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

☆載體保存法：土壤保存法；砂土保存法；硅膠保存法；磁珠保存法；麩皮保存法；紙片(濾紙)保存法。

菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

基本概念：

(1) ‘產(chǎn)品名稱菌群：由多種混合組成的相對穩(wěn)定的群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上分類，通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類群體，與同屬內其他種有著明顯差異；當涉及到保存時，菌種是指的種子（用來長期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個菌種內的可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。

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