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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:火雞源性成分 (Turkey)PCR實(shí)驗(yàn)試劑

  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R5045
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
火雞源性成分 (Turkey)PCR實(shí)驗(yàn)試劑不需要分離病毒培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
詳情介紹:

使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應(yīng)終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:火雞源性成分 (Turkey)PCR實(shí)驗(yàn)試劑

英文名稱:詳見說明
貨號:BJ-01R5045

產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒

運(yùn)輸:低溫

保存:負(fù)20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

 

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運(yùn)輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);

u 運(yùn)輸:采用**或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研。

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

 

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

APRIL Human  10μg  Nikethamide  5mg    

Ac-Tyr-Phe-OH  5μg  UMOD Human  1mg    

(R)-baclofen  10mg  Timonacic (1,3-Thiazolidine-4-carboxylic acid)  5μg    

Arachidoyl glycine  50mg  BAY 57-1293  5mg    

H-Ala-Phe-Ala-OH  25mg  Sporidesmolide I  200mg    

Boldine  25mg  Arachidic Acid-d2  10mg    

Madrasin  5mg  Pralsetinib (Blu667)  10mM*1mLinDMSO    

Mebendazole  50mg  Tipifarnib S enantiomer ((S)-(-)-R-115777)  1mg    

13-cis-N-[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl]retinamide (Ethyl 4-((2Z,4E,6E,8E)-3,7-dimethyl-9-(2,6,6-trimethylcyclohex-1-en-1-yl)nona-2,4,6,8-tetraenamido)benzoate)  25mg  Phorbol (4β-Phorbol)  500μg    

Mirtazapine  10mg  Seviteronel  10mM*1mLinDMSO    

5,15-DPP  10mg  Cyanidin 3-O-arabinoside  1mg    

Zinquin ethyl ester  1mg  CB-1158 (INCB01158)  20μg    

Uvarigranol B  5mg  Amyloid β-Protein (1-38)  5μg    

5-APDB (hydrochloride)  100mg  AZD3839  100mg    

GSK1059865  1mg  (-)-CP 47,497  5mg    

火雞源性成分 (Turkey)PCR實(shí)驗(yàn)試劑NSC713200  Bardoxolone Methyl is an IKK inhibitor, showing potent proapoptotic and anti-inf

TAK632  TAK-632 is a potent pan-Raf inhibitor with IC50 of 8.3 nM and 1.4 nM for B-Raf(w

BMS232632; CGP73547; HSDB7339;  Atazanavir Sulfate is a HIV protease inhibitor with Ki of 2.66 nM in a cell-free

MK1775  MK-1775 is a potent and selective Wee1 inhibitor with IC50 of 5.2 nM in a cell-f

Dacomitinib,PF299804  Dacomitinib 是一種特異,不可逆的 ERBB 家族抑制劑,作用于 EGFR,ERBB2 和 ERBB4 的 IC50 分別為 6 nM,45.7 nM

AZD9291 Mesylate  Osimertinib mesylate (AZD-9291 mesylate) 是不可逆的突變體選擇性 EGFR 抑制劑;對EGFRL858R 和EGFRL8

LY2874455; dovitinib  LY2874455 is a pan-FGFR inhibitor with IC50 of 2.8 nM, 2.6 nM, 6.4 nM, and 6 nM

Blu9931  BLU9931 是一種有效的,高度選擇性的,不可逆的成纖維細(xì)胞生長因子受體 4 (FGFR4) 抑制劑,其 IC50 值為 3 nM,Kd 值為 6 nM。BL

Sofosbuvir;PSI-7977; GS7977  Sofosbuvir (PSI-7977) 是 HCV RNA復(fù)制抑制劑,EC50 為92 nM。

AG490  AG-490 (Tyrphostin B42) is an inhibitor of EGFR with IC50 of 0.1 μM in cell-free

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