訂購信息：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因植物CamVS啟動子PCR實驗試劑
英文名稱：詳見說明
貨號：BJ-01R5049
產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒
運輸：低溫
保存：負20度
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】：
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；
u 運輸：采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。
本公司產(chǎn)品僅用于科研。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Demethylwedelolactone Sulfate 25mg INH1 2μg
BUD31 Human 10mM*1mLinDMSO 3’,4’-Dihydroxyphenylacetone 50mg
(S)-NIFE 1mg H-Arg(NO2)-OH 10mg
MEK inhibitor 100mg Fmoc-β,β-diphenyl-Ala-OH 1g
cis-12-Octadecenoic Acid methyl ester 100g Topotecan HCl 10mg
(rel)-MC180295 1g Cyproconazole 25mg
Osteostatin amide (human) 10mM*1mLinDMSO thio-p-Toluamide 5mg
Noroxycodone (hydrochloride) 5mg O-Phosphorylethanolamine 50mg
AX-024 hydrochloride 2μg ISO-1 100μg
AB-423 10mg Ranaconitine 10μg
H-Met-Asp-OH 10mg Mycophenolic acid D3 25mg
BETP 5mg PDE-9 inhibitor 10mg
ICI 211965 (ZM-211965) 1mg (H-Cys-Tyr-OH)2 25mg
Celgosivir (MBI 3253) 1mg ADSL Human 5g
H-8 (hydrochloride) 5mg Fmoc-Trp(Boc)-SASRIN? resin (200-400 mesh, 0.4-0.7 mmol/g) 5g
轉(zhuǎn)基因植物CamVS啟動子PCR實驗試劑MK-8776(SCH900776) SCH900776 (S-isomer)是SCH900776(HY-15532)的S型同分異構(gòu)體。
ML167;CID44968231;NCGC00188654) ML167 是一種高度選擇性的 Cdc2 樣激酶 4 (Clk4) 抑制劑，IC50 為 136 nM，比作用于相關(guān)激酶Clk1，Clk2，Clk3 和 Dyr
ML323 ML-323 是一種有效的可逆的 USP1-UAF1 抑制劑，在Ub-Rho實驗中，IC50 為 76 nM。
ML-347(LDN-193719) ML347(DN193719)是ALK1/ALK2選擇性抑制劑，IC50分別為46/32 nM，比對ALK3的抑制性高300倍。
Mocetinostat(MGCD0103) Mocetinostat (MGCD0103)是一種有效，可口服和同種型選擇性的 HDAC (Class I/IV) 抑制劑，抑制HDAC1，HDAC2，HDA
Mps1-IN-2 Mps1-IN-2 是一種有效的，選擇性的，ATP 競爭性的 Mps1/Plk1 雙重抑制劑，對 Mps1 的 IC50 和 Kd 值分別為 145 nM 和
MS436 MS436 是一種 bromodomain 抑制劑，有效作用于 BRD4 BrD1，Ki 為 30-50 nM，比作用于 BrD2 選擇性高 10 倍。
N6022 N6022 是一種有效的，選擇性的，可逆的 S-Nitrosoglutathione reductase (GSNOR) 抑制劑，IC50 值為 8 nM。
Necrostatin-1 Necrostatin-1 (Nec-1) 是一種有效，選擇性和可滲透細胞的壞死性凋亡 (necroptosis) 抑制劑，在 Jurkat 細胞中的 EC50
Nepicastat hydrochloride(SYN-117 hydrochloride) Nepicastat hydrochloride (SYN-117 hydrochloride) 是一種選擇性的，有效的，具有口服活性的多巴胺 β 羥化酶 (d
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。