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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:禽流感病毒HN亞型(AIV-HN)PCR實(shí)驗(yàn)試劑

  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R5077
  • 產(chǎn)品**:邦景
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簡單介紹:
禽流感病毒HN亞型(AIV-HN)PCR實(shí)驗(yàn)試劑不需要分離病毒培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
詳情介紹:

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:禽流感病毒HN亞型(AIV-HN)PCR實(shí)驗(yàn)試劑

英文名稱:詳見說明
貨號:BJ-01R5077

產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒

運(yùn)輸:低溫

保存:負(fù)20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運(yùn)輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);

u 運(yùn)輸:采用**或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研。

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。


使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應(yīng)終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

Progesterone-3-biotinyl Photoaffinity Probe  10μg  Trimethoprim-PEG-amine (trifluoroacetate salt)  1mg    

L-Glutathione Reduced  5μg  PF 4800567 hydrochloride  1mg    

(+)-Cloprostenol (sodium salt)  1mg  Boc-MLF TFA  5μg    

H-1-Nal-OH  1mg  Pempidine (1,2,2,6,6-Pentamethylpiperidine)  5mg    

Cortistatin-8  500mg  MeOSuc-AAPV-pNA  1mg    

4-Fluoroethamphetamine (hydrochloride)  5mg  Rebaudioside E  10mg    

SP 600125  500ug  GHV (sodium salt)  25mg    

NTS Human, sf9  5mg  AR-C155858  5mg    

Phenibut (hydrochloride)  100mg  Prasugrel hydrochloride  10mM*1mLinWater    

Ropitoin (TR 2985)  1mg  Spermidine trihydrochloride  10mg    

Deprodone propionate (RD20000)  20μg  Rucaparib Camsylate  1mg    

(D-His1)-Exenatide  5mg  4-Pyridylthioamide  500μg    

Fexofenadine HCl  500mg  (±)7-HDHA  500μg    

OXF BD 02  1g  Fmoc-D-Orn(Aloc)-OH  10mM(in1mLDMSO)    

DBCO-acid  500mg  Orphenadrine Citrate  5mg    

禽流感病毒HN亞型(AIV-HN)PCR實(shí)驗(yàn)試劑小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白細(xì)胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠白介素7(IL-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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