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產(chǎn)品名稱：牛肺炎支原體熒光PCR檢測試劑盒
貨號：BJ-01R5028
產(chǎn)品規(guī)格：50T
運輸：低溫
保存：負20度
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

【儲存條件及有效期】
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】：
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
u 運輸：采用或泡沫箱加冰密封進行運輸。
本公司產(chǎn)品僅用于科研。
【自備試劑】
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
使用方法
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括量和相對定量）和定性分析。產(chǎn)品僅用于科研使用
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸（標準品）Aceclofenac質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209質(zhì)量規(guī)格：>98%，選擇性JAK2抑制劑

人角膜細胞總RNAHK NA鹽酸阿扎司瓊（標準品）Azasetron 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106)鹽酸普萘洛爾（標準品）Propranolol 質(zhì)量規(guī)格：溶出度檢查

貓源細胞美他多辛（標準品）Metadoxine質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
人張氏肝細胞;Chang liver二(2-基)二硫，英文名或英文縮寫：Allyl disulfide，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

SUME-a細胞，人鼻咽癌細胞系 大鼠肝癌細胞,RH-35細胞 CM-H087人冠狀動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2-錄三拂本 99% 2-Chlorobqnzotrifluoridq 88-16-4

P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2十三酸，英文名或英文縮寫：Tridecanoic acid，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml2iPRiboside異戊1基腺嘌呤核苷20毫克超，99%

腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)50-81-7維生素CAscorbic Acid;VitaMin C
牛肺炎支原體熒光PCR檢測試劑盒人胚肺成纖維細胞;MRC-5717陰離子交換樹脂shēng huà shì jì容量：2～8℃250U

CCC-HEK-1細胞，人胚腎二倍體細胞 鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細胞,PT67細胞 CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×21-安言醋鹽;1-安基言醋鹽; α-安言醋鹽 1-NcphthylcMinq xy7nochloridq;1-cMinoncphclqnq xy7nochloridq; 22-46-2

COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2吩噻嗪shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克

hMNC-CB-c pooledula-pure 臍帶血來源的人類單核細胞 人前列腺微血管內(nèi)皮細胞HPrMECL-還原型谷胱甘肽，英文名或英文縮寫：GSH，級別：BR，99%，規(guī)格：1克

RSC, 大鼠雪旺細胞甲氧基乙酸metxyl metxoxyacetate;