一抗操作步驟：
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉：?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點與抗體結(jié)合，?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來封閉膜上的未結(jié)合位點，?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉，?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動1～2小時，?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進行洗膜，?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育：?在一抗孵育之前，?需要參考一抗的說明書，?按照適當比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后，?立即加入稀釋好的一抗，?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動孵育1～2小時。?如果一抗孵育一小時效果不佳，?可以在4℃緩慢搖動孵育過夜。?然后回收一抗，?加入Western洗滌液，?在搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘，?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高，?可以適當延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌：?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合，?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液，?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合，?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時間根據(jù)具體實驗來確定，?建議清洗3-5次，?每次5分鐘。
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貨號 |
規(guī)格 |
價格 |
用途 |
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BJ006602 |
50ul |
1380 |
僅供科研實驗 |
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BJ006602 |
100ul |
2380 |
僅供科研實驗 |
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BJ006602 |
200ul |
3480 |
僅供科研實驗 |
商品屬性：
英文名稱：Cytokeratin 3
中文名稱：細胞角蛋白3抗體
別 名；65 kDa cytokeratin; CK-3; CK3; Cytokeratin-3;
K2C3_HUMAN; K3; Keratin 3; Keratin; Keratin type II cytoskeletal 3; Keratin-3;
KRT3; type II cytoskeletal 3; Type-II keratin Kb3.
研究領(lǐng)域；細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞骨架
抗體來源；Rabbit
克隆類型；Polyclonal
交叉反應；Human, (predicted: Mouse, Rat, )
產(chǎn)品應用；ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量；64kDa
細胞定位；細胞漿 細胞外基質(zhì) 分泌型蛋白
性 狀；Liquid
濃 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Cytokeratin 3: 41-140/628
亞 型；IgG
純化方法；affinity purified by Protein A
保存條件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗體注意事項：
確定抗體的名字和特性：?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息，?這些信息對于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實驗類型：?了解你的實驗類型（?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS）?，?因為抗體的說明書通常會列出該抗體經(jīng)驗證過的實驗類型。?如果說明書沒有提及某種應用類型，?并不意味著該抗體不適用于該實驗，?只是表示尚未經(jīng)過該實驗驗證。?
選擇適當?shù)膶嶒灅颖痉N屬：?確定你的實驗樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等，?因為抗體的說明書會列出該抗體經(jīng)試驗驗證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)：?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體，?特別是當樣本蛋白在提取和處理過程中可能會變性時，?這會影響抗體的親和反應。?
單多克隆抗體的選擇：?單克隆抗體特異性強但親和力相對小，?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強。?根據(jù)實驗需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性：?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應選擇針對已充分表征的原產(chǎn)生的抗體，?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇：?封閉液的選擇應根據(jù)抗體說明書進行，?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點，?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項：?使用干凈的孵育盒子，?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號。?如果一次性需要檢測多個蛋白，?可以考慮將膜剪開或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
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